SCIENTZ-2CS基因?qū)雰x由儀器主機、基因?qū)氡皩S眠B接線等組成。主要是利用電轉(zhuǎn)化來將DNA轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞、動植物細(xì)胞、酵母細(xì)胞中。與其它方法相比,基因?qū)雰x法具有高重復(fù)性,高效率、操作簡易、可定量控制等優(yōu)點,同時,電轉(zhuǎn)沒有基因毒性,已經(jīng)成為分子生物學(xué)基本技術(shù)。
工作原理
細(xì)胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細(xì)胞電穿孔(electroporation),是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)部的重要方法。
在瞬間強大電場的作用下,溶液中細(xì)胞的細(xì)胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細(xì)胞膜。由于細(xì)胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細(xì)胞外部電流場產(chǎn)生的細(xì)胞兩極電壓都被細(xì)胞膜承受,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細(xì)胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細(xì)胞膜后只能停止在細(xì)胞膜附近,隨后細(xì)胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細(xì)胞核等處。
由于電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法,細(xì)胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細(xì)胞種類上,而且容易定量控制。
細(xì)胞電轉(zhuǎn)電場圖

1細(xì)胞膜近似絕緣體,細(xì)胞附近電轉(zhuǎn)液中電流扭曲。
2在串聯(lián)電路中電阻越大分到電壓越大,細(xì)胞兩端電壓基本都落在兩端細(xì)胞膜上。
3只有一個細(xì)胞端面電轉(zhuǎn)有效。
4細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到電壓很小,DNA電轉(zhuǎn)進入細(xì)胞膜后馬上停止,后續(xù)靠細(xì)胞本身機制慢速擴散。
5細(xì)胞核兩端電壓及其微小,微小的電壓又落在核膜上,核內(nèi)部沒有電壓,電轉(zhuǎn)沒有基因毒性。
產(chǎn)品特點

•效率高轉(zhuǎn)化時間短、轉(zhuǎn)化率高、重復(fù)性優(yōu)異
•智能儲存可存儲實驗參數(shù),方便用戶調(diào)取
•控制精準(zhǔn)采用微處理器控制的脈沖放電
•外形美觀整機一體化設(shè)計,顯示直觀,操作簡單
基因?qū)雰x應(yīng)用領(lǐng)域

•細(xì)菌、酵母及其他微生物的電轉(zhuǎn)化;
•哺乳動物細(xì)胞的轉(zhuǎn)染、植物組織和原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)染;
•細(xì)胞雜交、融合基因?qū)?
•導(dǎo)入標(biāo)記基因起到標(biāo)記、指示的作用;
•導(dǎo)入藥物、蛋白、抗體等分子對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能進行研究;
不同菌種的轉(zhuǎn)化率

實驗舉例

技術(shù)參數(shù):
| 型號 | SCIENTZ-2CS |
| 脈沖形式 | 指數(shù)衰減 |
| 高壓輸出電壓 | 401-3000V |
| 低壓輸出電壓 | 50-400V |
| 高壓電容 | 10μF、25μF、35μF、50μF、60μF |
| 低壓電容 | 50μF、100μF、125μF、150μF....1560μF以25μF步進 |
| 并接電阻 | 50Ω、100Ω、150Ω....1650Ω以50Ω步進 |
| 操作系統(tǒng) | 微電腦控制 |
| 時間常數(shù) | 帶RC時間常數(shù),可調(diào)節(jié) |
| 主機外形尺寸 | 40*30*20cm |
| 主機凈重 | 5.5kg |
| 包裝尺寸 | 58*36*25cm |